尊龙凯时提供的细胞介绍：

细胞来源

该细胞源自一名1岁的男孩，其被诊断为急性单核细胞性白血病。细胞经过从外周血中分离后建立，具有吞噬乳胶颗粒和激活红细胞的能力。在细胞膜和胞浆内未发现免疫球蛋白，但表达C3R和FcR。此外，该细胞还可在佛波酯TPA的诱导下，向单核系方向分化，并能够作为转染宿主。

细胞信息

细胞名称：Thp-1人单核细胞白血病

生长特性：该细胞呈现悬浮状态，且易于聚团，处于低密度时；在高密度下则表现为分散。

倍增时间：通常为60-70小时（PubMed=6970727），或26小时（PubMed=25984343），以及约35-50小时（DSMZ=ACC-16）。

换液频次：每周2~3次

传代比例：一般为1:2-1:4（具体比例可根据实际细胞量进行调整），细胞需在8×10^6/ml的浓度下进行传代，且不应超过1×10^6/ml。

培养基推荐配方

RPMI-1640（货号：ZQ-200）+10%胎牛血清（货号：ZQ0500）+1%双抗（货号：CSP006）+β-Mer，终浓度为0.05 mM（货号：CSP005，例：500ml培养基添加500μl）。

β-巯基乙醇作为一种常用的培养补充剂，具有抗氧化作用，可以降低氧化应激对THP-1细胞的影响。若细胞密度过大且需要维持，则可适当增加巯基乙醇的比例，但不得超过标准量的15倍。

细胞复苏

THP-1细胞复苏后通常需3-5天恢复生长状态。由于细胞对密度的依赖性，若在复苏时去除冻存液，建议在复苏后48小时内避免对细胞进行操作。通常，复苏初期的低细胞密度属于细胞快速增殖的正常现象。

细胞传代

A. THP-1细胞为悬浮细胞，且对低密度依赖。当细胞密度达到8×10^5活细胞/mL时需进行传代，且细胞密度不应超过1×10^6活细胞/mL。

B. 一般传代比例为1:2-4，可在分瓶后补充培养基，无需离心。以T25培养瓶为例，分瓶后补充新鲜完全培养基至7ml。

C. 若对悬浮细胞密度控制不佳，最佳解决方案是进行细胞计数。

D. 培养一周后可进行一次离心，以去除部分死细胞。

细胞冻存

A. 采用10%DMSO：900μlFBS+100μlDMSO（请小心操作），或直接选择无血清冻存液。

B. 收集生长状态良好的细胞于15ml离心管中，调整细胞浓度至约200万-300万/mL为宜。

C. 根据情况将细胞放入-80℃冷冻箱，最长可存放3个月，尽快转移至液氮中进行长期保存。

常见问题解答

1. THP-1细胞在培养过程中出现聚团，如何处理？

少量细胞聚团呈葡萄串状，属于正常现象，尤其在低细胞密度时更易出现。高密度时，细胞会自然分散，如聚团仍然严重，可通过观察细胞状态、调整巯基乙醇用量、或更换血清品牌及增加血清比例（不超过20%）来改善。

2. 如果在培养过程中细胞出现贴壁，怎么办？

少量细胞贴壁属于正常现象，建议轻轻吹打以收集细胞，或直接丢弃部分贴壁细胞。然而，当贴壁细胞比例高于20%时，需检查培养箱温度、CO2浓度、培养基成分及培养器皿是否异常。

3. 如果THP-1细胞复苏不成功，如何处理？

该细胞在冻存后的复苏率可能较低，因此冻存时应根据情况增加细胞量，冻存时活细胞密度需保持在100万-300万/mL。复苏后，细胞的恢复状态可能需要3-5天，如有细胞碎片，则可在细胞密度增大后通过低速离心去除。

THP-1细胞为悬浮细胞，在培养时需谨慎处理，尽量在低细胞密度情况下少加离心处理，以减少对细胞的损伤。更换培养基时切勿全部替换。

此外，添加β-巯基乙醇时，请现配现用，避免直接添加至长期储存的培养基中，以保持其稳定性。

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